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DiOC2(3) 膜电位荧光探针（绿色，红色）是一种应用广泛的膜电位探针。常被用于线粒体膜电位的研究，DiOC2(3) 膜电位荧光探针（绿色，红色） 能够穿透真核细胞的细胞质，在浓度低于 100 nM 时，染料在具有活跃膜电位的线粒体中积累，形成红色荧光聚集体，当使用破坏线粒体膜电位的（如 CCCP）处理细胞时，DiOC2(3) 膜电位荧光探针（绿色，红色） 染色强度降低。
DiOC2(3) 膜电位荧光探针（绿色，红色） 染色的细胞可以通过流式细胞仪的蓝色激发，绿色和红色发射可视化。该试剂可与其他试剂搭配使用，例如红色激发的 Annexin V–APC，用于活力和凋亡的研究。
一、核心优势：膜电位依赖性的 “双色荧光切换”
DiOC?(3) 的荧光特性与细胞膜电位直接相关，这种 “电位敏感的颜色变化” 是其区别于多数单一荧光信号探针的关键，也是其最核心的优势。
荧光颜色随膜电位可逆变化DiOC?(3) 是一种亲脂性阳离子染料，会因细胞膜内外的电位差（内负外正为静息电位）被 “吸引” 并富集于细胞膜内侧及线粒体等负电性细胞器膜上。其荧光行为取决于在膜上的聚集程度，而聚集程度由膜电位调控：
低电位 / 静息状态：染料在膜上分散分布，主要发射绿色荧光（激发峰约 484 nm，发射峰约 501 nm）。
高电位 / 去极化状态：膜电位差减小，染料在膜上聚集程度升高，形成二聚体或多聚体，荧光发生 “红移”，主要发射红色荧光（二聚体发射峰约 620 nm）。这种变化是快速、可逆的，能实时反映细胞从静息到激活（如神经元放电、细胞凋亡早期线粒体去极化）的电位动态过程。
可通过 “红绿荧光比值” 定量分析膜电位由于绿色和红色荧光强度的比值（红 / 绿比）与膜电位变化呈良好的线性关系，无需依赖单一荧光信号的绝对强度（易受染料浓度、细胞厚度等干扰），可通过比值法对膜电位进行定量或半定量分析，显著提高了检测的准确性和重复性。
二、优异的细胞渗透性与靶向性
快速穿透细胞膜，染色操作简便DiOC?(3) 具有良好的亲脂性，无需转染试剂即可快速穿透活细胞的细胞膜，通常在室温或 37℃下孵育几分钟至十几分钟即可完成染色，且无需洗涤（或仅需简单洗涤）即可成像，实验流程高效便捷。
同时标记细胞膜与线粒体，一举两得除了细胞膜，DiOC?(3) 还会因线粒体的高膜电位（内膜内负外正，电位差远高于细胞膜）而高度富集于线粒体基质，因此可同时实现细胞膜标记和线粒体标记。这种 “双重靶向性” 使其能同时观察细胞膜电位变化和线粒体功能状态（线粒体去极化是细胞凋亡的关键标志），尤其适合细胞凋亡、细胞应激等研究场景。
三、良好的生物相容性与广泛适用性
低细胞毒性，适合活细胞成像在常规染色浓度下（通常为 10-100 nM），DiOC?(3) 对多数哺乳动物细胞（如神经元、上皮细胞、免疫细胞、肿瘤细胞等）的毒性极低，不会显著影响细胞的正常生理活性（如增殖、电活动、代谢），可用于活细胞的长时间动态成像。
适用多种细胞类型与实验模型不仅适用于体外培养的原代细胞、细胞系，还可用于植物细胞、酵母细胞以及小型模式生物（如线虫、斑马鱼胚胎）的膜电位检测，应用场景覆盖细胞生物学、神经科学、肿瘤学、药理学等多个领域。
四、与常规成像技术兼容性强
DiOC?(3) 的激发和发射光谱与常用的荧光显微镜（如宽场荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜）的滤光片系统高度匹配：
绿色荧光可通过 FITC 滤光片组（激发 465-495 nm，发射 515-555 nm）检测；
红色荧光可通过 TRITC 或 Cy3 滤光片组（激发 530-560 nm，发射 573-648 nm）检测。无需特殊的成像设备或改装，降低了实验门槛，便于普及应用。
总结
DiOC?(3) 的核心优势可概括为：膜电位依赖性的双色荧光切换与比值定量能力、快速的细胞渗透性、细胞膜与线粒体双重靶向性、低毒性与广泛适用性、设备兼容性强且成本低廉。这些特性使其成为研究活细胞膜电位动态变化、线粒体功能以及细胞状态（如凋亡、激活）的经典且高效的工具。
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