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神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料,用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。NerveRedTM 系列探针是具有三个双键的染料。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时,染料的水相部分没有荧光,而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后,在进行胞吞作用时,染料被包裹在囊泡内,因此,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少。反之,在胞吐作用时,染料与神经递质一起从囊泡释放,导致荧光信号减少。因此,荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率-“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率-“解离速率”因染料种类而异。通常,具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力,因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。
近红外荧光特性:NerveRedTM C2 在细胞膜中的激发波长为 510nm,发射波长为 750nm,属于近红外波段。近红外光具有较强的组织穿透能力,能减少生物组织对光的吸收和散射,降低自发荧光干扰,从而提高成像的信噪比和分辨率,适用于深层组织中神经元的成像。
灵敏度高:该探针用量少,纳摩尔浓度(nM)染色即可满足实验要求,能够检测到少量的神经元或神经末梢。
特异性标记神经元:作为神经末梢探针,NerveRedTM C2 能通过活性依赖性染色突触小泡,其亲脂性尾部可插入神经元细胞膜,而对其他细胞类型的标记能力较弱,从而实现对神经元的特异性标记,清晰显示神经元的形态和结构。
荧光稳定性好:NerveRedTM C2 与细胞膜结合后,染色效果可持续较长时间,能够满足长时间动态观察神经元活动的需求,如追踪神经元的突触活动、轴突运输等过程。
操作简便:该探针可溶于水,使用时只需将其稀释到适当浓度,与细胞或组织共孵育即可,无需复杂的操作步骤和特殊的仪器设备。
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