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神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料,用于跟踪神经肌肉接头或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。SynaptoBright 系列探针是具有单个双键的染料。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时,染料的水相部分没有荧光,而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后,在进行胞吞作用时,染料被包裹在囊泡内,因此,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少;反之,在胞吐作用时,染料与神经递质一起从囊泡释放,导致荧光信号减少。因此,荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率-“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率-“解离速率”因染料种类而异。通常,具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力,因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。
高灵敏度和特异性:SynaptoBright C4 是一种阳离子苯乙烯基荧光染料,能通过活性依赖性方式染色突触小泡。染料的亲脂性尾部可插入细胞膜并呈现强荧光,而在水相部分则无荧光。神经刺激后,在胞吞作用过程中,染料被包裹在囊泡内,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱可准确表示新形成的囊泡的数量,能高灵敏度地反映突触的胞吞 / 胞吐活动,对突触活动的检测具有高度特异性。
荧光特性优良:该探针在甲醇中的最大激发波长为 510nm,最大发射波长为 625nm,在细胞膜中的最大激发波长为 480nm,最大发射波长为 598nm 左右,能够提供清晰的绿色荧光信号,便于观察和检测。同时,其光稳定性较好,可用于长时间的实时成像观察。
适用于多种细胞和组织类型:可用于活细胞或组织切片的染色,适用于神经元细胞以及神经肌肉接头等组织,能够在不同的实验体系中对突触活动进行有效标记和研究。此外,它还可以用于标记细菌和酵母等微生物,适用范围广泛。
多色成像兼容性好:该探针可以与红色荧光染料(如 SynaptoRed)结合使用,实现对突触或神经肌肉接头的双色成像,便于同时观察不同的细胞结构或分子,为研究突触的复杂生理过程提供了更多的信息和手段。
操作相对简便:染色操作相对简单,通常只需将染料与细胞或组织进行共孵育,然后洗去未结合的染料即可进行成像分析,无需复杂的操作步骤和特殊的仪器设备。
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