NBD C6-神经酰胺/Hoechst 33342 高尔基体染色试剂盒（绿色，蓝色），荧光染料在科研领域中的优势

2025-09-19

NBD C6-神经酰胺/Hoechst 33342 高尔基体染色试剂盒（绿色，蓝色）是由囊泡和折叠膜组成的复合体，位于大多数真核细胞的细胞质中，参与分泌和胞内物质运输。NBD C6-神经酰胺（绿色）是一种高尔基体绿色荧光探针，可用于活细胞中快速特异性荧光染色细胞高尔基体。

NBD C6-神经酰胺/Hoechst 33342 高尔基体染色试剂盒（绿色，蓝色）是牛血清白蛋白 (BSA) 和 NBD C6-神经酰胺（绿色）的复合物，常用于活细胞脂类运输和代谢的研究，相比较于传统的同类型探针，将 NBD C6-神经酰胺与 BSA 反应形成复合物，其呈现出更高的摩尔吸光系数和光量子产量且光稳定性更强，对活细胞高尔基体的标记更加高效。

一、染料组成与标记原理

该试剂盒包含两种荧光染料：

NBD C6 - 神经酰胺（N-(7 - 硝基苯并 - 2 - 恶唑 - 1,3 - 二唑)-6 - 氨基己酰基神经酰胺）：绿色荧光探针，可特异性标记高尔基体的脂质成分，通过细胞膜进入细胞后富集于高尔基体；
Hoechst 33342：蓝色荧光核酸染料，可穿透活细胞膜，与 DNA 结合后发出蓝色荧光，用于细胞核染色。二者结合可实现高尔基体与细胞核的双标成像，其优势源于高尔基体靶向性、活细胞适用性及光谱兼容性。

二、NBD C6 - 神经酰胺的核心优势

1. 高尔基体的特异性标记与动态追踪

脂质代谢依赖性靶向定位：NBD C6 - 神经酰胺是神经酰胺的类似物，可被细胞摄取并参与鞘脂代谢。在细胞内，它首先被转运至内质网，随后通过囊泡运输特异性富集于高尔基体（尤其是顺面高尔基体网络），极少分布于其他细胞器（如线粒体、溶酶体），因此能精准标记高尔基体的结构与动态。
活细胞中高尔基体形态的实时观察：染料进入细胞后无需固定即可发出荧光，适合追踪高尔基体在细胞周期、分泌活动或药物处理（如 Brefeldin A 破坏高尔基体结构）中的形态变化（如囊泡出芽、膜融合）。

2. 荧光信号的稳定性与细胞通透性

良好的膜透性与低毒性：NBD C6 - 神经酰胺为脂溶性小分子，可自由透过细胞膜，且对细胞毒性极低（浓度≤10 μM 时不影响细胞活性），适合长时间活细胞成像（如数小时内的高尔基体动态观察）。
抗淬灭性与固定后兼容性：其荧光（激发 / 发射≈460/530nm）在固定细胞（如多聚甲醛固定）中仍能保持稳定，可与其他抗体或荧光探针（如线粒体染料、GFP 融合蛋白）共染，用于多细胞器共定位分析。

3. 光谱特性与多色实验适配性

绿色荧光与多通道检测兼容：NBD 的发射光谱位于绿色波段，可与蓝色（Hoechst）、红色（如 Texas Red、Alexa Fluor 594）或远红外荧光探针同时使用，在共聚焦显微镜中通过不同通道分离信号，避免光谱重叠。例如：
- 绿色：NBD C6 - 神经酰胺（高尔基体）
- 蓝色：Hoechst 33342（细胞核）
- 红色：线粒体染料（如 MitoTracker Red），实现三标成像。
适配多种检测平台：其激发波长（460nm）兼容蓝光激光器（如 488nm）或荧光显微镜的 UV / 蓝光激发通道，无需特殊设备即可检测，适合常规实验室使用。

4. 操作简便性与实验效率

无需复杂样品处理：活细胞染色仅需将染料直接加入培养基，孵育 15-30 分钟后即可观察，无需透膜、抗体孵育等步骤，相比免疫荧光标记（需一抗 / 二抗多步操作）显著缩短实验时间，适合高通量筛选（如药物对高尔基体形态的影响筛选）。
高信噪比与低背景：NBD C6 - 神经酰胺在高尔基体以外的细胞器或细胞质中分布极少，染色后背景荧光低，尤其适合高分辨率成像（如共聚焦显微镜下高尔基体堆叠结构的清晰呈现）。

三、Hoechst 33342 的优势（作为核标记的补充价值）

活细胞与死细胞的核染色能力：
- 可穿透活细胞膜，与 DNA 双螺旋的 A-T 富集区域结合，染色后细胞核呈现均匀蓝色荧光，适用于活细胞周期分析（如 G1/S/G2 期鉴别）或凋亡细胞的核形态观察（如核固缩、碎裂）。
低光毒性与定量分析适配性：
- 相比 DAPI，Hoechst 33342 的光毒性更低，适合长时间活细胞成像；其荧光强度与 DNA 含量正相关，可通过流式细胞术定量细胞周期分布。
与 NBD 的光谱互补性：
- 蓝色荧光（激发 / 发射≈350/461nm）与 NBD 的绿色荧光无重叠，二者结合可清晰区分高尔基体与细胞核的空间位置关系，便于分析细胞内物质运输（如从高尔基体到细胞核的信号分子转运）。

四、注意事项与延伸优势

活细胞染色时间控制：NBD C6 - 神经酰胺在细胞内会逐步代谢为其他脂质（如神经节苷脂），长时间孵育（>2 小时）可能导致荧光信号从高尔基体扩散至细胞膜或溶酶体，建议染色后 1 小时内完成观察。

定量分析潜力：通过图像分析软件（如 ImageJ）可量化高尔基体的荧光强度、面积或数量，用于比较不同处理组的高尔基体形态变化（如药物处理后高尔基体碎片化程度的定量）。

该试剂盒结合 NBD 的高尔基体特异性与 Hoechst 的核标记能力，在活细胞动态成像、多细胞器共定位及高通量功能研究中具有独特优势，尤其适合需要快速、精准标记高尔基体结构的细胞生物学实验。

本文引用地址：https://www.med-life.cn/product/1296672.html

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