产品货号                                      产品名称

                    PR01104                 BFTM 488 鬼笔环肽（AF，绿色）

                    PR01106                 BFTM 594 鬼笔环肽（AF，红色）

                        PR01105                 BFTM 555 鬼笔环肽（YF，橙红色）

                        PR01108                 BFTM 633 鬼笔环肽（YF，远红外）

                         PR01110                 BFTM 680 鬼笔环肽（YF，近红外）

                 PR01111                        罗丹明 鬼笔环肽（橙红色）

鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种毒素，可特异性结合于 F-肌动蛋白的双环肽。因此用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便地研究 F-肌动蛋白的分布。鬼笔环肽内部，在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见的硫醚桥形成内环结构。在 pH 升高时，该硫醚被裂解，鬼笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。

BF^TM  染料是我司开发的一系列新一代荧光染料，与其他荧光染料相比，在亮度，光稳定性和水溶性方面具有综合优势。BF^TM  荧光染料标记的鬼笔环肽可在纳摩尔水平染色 F-肌动蛋白。在各种植物细胞或动物细胞中，标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力，平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。不同于抗体，鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显著变化。非特异性染色可以忽略不计，染色和未染色区域之间的对比度非常大。鬼笔环肽将单体/聚合物的平衡转向聚合状态，将聚合临界浓度降低至 30 倍。鬼笔毒肽类 (Phallotoxins) 可通过抑制细胞松弛素的解聚，碘化钾和升高的温度，稳定F-肌动蛋白。因为鬼笔环肽缀合物很小，大约直径 12~15 ?，分子量 < 2000 Daltons，多种肌动蛋白结合蛋白， 包括肌球蛋白，原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。更重要的是，鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保持功能，标记甘油肌纤维仍然收缩，标记的肌动蛋白丝仍然可以继续移动。而且荧光标记的鬼笔环肽也可用于对细胞中 F-肌动蛋白进行定量研究。

一、荧光偶联鬼笔环肽的核心优势

1. 肌动蛋白标记的高特异性与选择性

• 仅结合 F-actin，排除 G-actin 干扰：鬼笔环肽仅识别 F-actin 的螺旋结构，对 G-actin 无亲和力，因此标记的是细胞中已聚合的肌动蛋白纤维（如应力纤维、微丝束、细胞皮层等），而非游离单体。这一特性使其能精准反映肌动蛋白的组装状态，避免非特异性染色。

• 比抗体更高效的小分子结合：鬼笔环肽分子量小（约 1kDa），比抗体（约 150kDa）更易穿透细胞，尤其适合厚组织切片或固定细胞的快速染色，且无需考虑抗体的种属特异性或交叉反应问题。

2. 荧光信号的稳定性与抗降解能力

• 抗肌动蛋白解聚与荧光漂白：鬼笔环肽与 F-actin 结合后可稳定肌动蛋白纤维，抑制其解聚（如细胞凋亡或药物处理时的骨架破坏），同时偶联的荧光染料（如 Alexa Fluor 488/594）具有高光稳定性，耐长时间激发，适合动态成像（如活细胞实时观察细胞迁移中的肌动蛋白重组）。

• 化学稳定性强，适合长期保存：偶联物在 4℃避光条件下可保存数月，染色后样本在固定液（如多聚甲醛）中仍能维持荧光信号，便于批量处理或后续复染（如核染色、其他标志物共定位）。

3. 光谱多样性与多色实验兼容性

• 多种荧光染料可选，适配不同检测平台：鬼笔环肽可偶联多种荧光基团，覆盖从可见光到近红外光谱，例如：

  • 绿色荧光（如 FITC、Alexa Fluor 488）：激发 / 发射≈488/518nm，兼容蓝光激光器或荧光显微镜的 FITC 通道；

  • 红色荧光（如 Alexa Fluor 594、PE）：激发 / 发射≈594/617nm，适合与绿色荧光蛋白（GFP）或其他绿色标记共定位；

  • 远红外荧光（如 Alexa Fluor 647）：激发 / 发射≈647/668nm，适用于深层组织成像或流式细胞术的多参数分析。

• 无物种限制，适配多种样本类型：无论动物、植物、真菌还是原核细胞（如某些细菌表达肌动蛋白类似蛋白），只要存在 F-actin，鬼笔环肽均可特异性标记，通用性远超物种特异性抗体。

4. 操作简便性与实验效率优势

• 一步染色，无需洗涤或扩增步骤：相比抗体染色的多步洗涤（如封闭、一抗 / 二抗孵育），鬼笔环肽染色仅需固定细胞后直接孵育（通常 10-30 分钟），无需透膜处理（因分子量小可穿透固定后的细胞膜），显著缩短实验时间，适合高通量筛选（如细胞迁移实验的肌动蛋白骨架分析）。

• 低背景与高信噪比：鬼笔环肽与 F-actin 的结合效率高（1 个鬼笔环肽分子结合 1 个肌动蛋白亚基），非特异性吸附极低，染色后细胞背景干净，尤其适合高分辨率成像（如共聚焦显微镜或超分辨显微技术）。

二、典型应用场景

1. 细胞骨架动态研究：

   • 观察细胞迁移时伪足中的肌动蛋白聚合（如应力纤维形成）、胞质分裂时收缩环的组装，或药物（如细胞松弛素）对肌动蛋白解聚的影响。

2. 细胞形态与功能关联分析：

   • 结合核染色（如 DAPI）或细胞器标记（如线粒体染料），研究肌动蛋白骨架与细胞极性、分化或凋亡的关系（如凋亡细胞中肌动蛋白皮层的崩解）。

3. 组织学与病理学研究：

   • 在肿瘤组织切片中标记血管内皮细胞的肌动蛋白，评估血管生成状态；或在肌肉组织中检测肌纤维的排列异常（如肌营养不良模型）。

4. 高分辨率成像技术：

   • 作为超分辨显微镜（如 STED、PALM）的标记物，因其小分子特性和高结合效率，可实现肌动蛋白纤维的纳米级分辨率成像。

三、注意事项与延伸优势

• 活细胞标记限制：鬼笔环肽需细胞固定后染色（因对活细胞有毒性），若需活细胞动态标记，可选择 GFP - 肌动蛋白融合蛋白，但二者可结合使用（固定后鬼笔环肽复染增强信号）。

  定量分析潜力：通过荧光强度定量 F-actin 的聚合程度（如流式细胞术检测细胞群的肌动蛋白含量），或结合图像分析软件（如 ImageJ）计算肌动蛋白纤维的密度与排列方向。

鬼笔环肽与荧光染料的偶联技术，凭借其对 F-actin 的绝对特异性、信号稳定性及操作简便性，成为细胞骨架研究中不可替代的工具，尤其在需要高分辨率、高信噪比的结构生物学与细胞生物学实验中优势显著。