Oxazole Yellow/PI 膜透性凋亡检测试剂盒（绿色，红色），荧光染料在科研领域中的优势

2025-09-18

Oxazole Yellow/PI 膜透性凋亡检测试剂盒（绿色，红色），是一种基于 Oxazole yellow 和 PI 两种染料的双荧光法检测凋亡的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪及其它荧光检测系统。

Oxazole yellow 是一种非细胞膜穿透性的并对 DNA 具有高亲和力的羰花青单体绿色荧光染料，在没有与 DNA 结合的时候基本上没有荧光，而与 DNA 结合后可以发出明亮的绿色荧光。在细胞凋亡发生时，细胞膜通透性发生改变，此时 Oxazole yellow 可以进入细胞内与 DNA 结合，发出明亮的绿色荧光，因此常用于细胞凋亡的检测。需要注意的是 Oxazole yellow 也能染色死细胞，因此需要和对死细胞特异性荧光染色的 PI 进行双染才能有效判定细胞凋亡。

PI （碘化丙啶，Propidium Iodide）是?种可对 DNA 染?色的红色荧光染料，是?种溴化?乙啶的类似物，在嵌?入双链 DNA 后释放红?荧光。尽管 PI 不能通过活细胞膜，但却能穿过死细胞破损的细胞膜?而对核染?色。因此，Oxazole yellow 与 PI 联合使用，可直接用于细胞凋亡的检测，凋亡细胞呈现绿色荧光，死细胞同时呈现红色和绿色荧光阳性，活细胞很少或几乎没有荧光。

一、Oxazole Yellow（恶嗪黄，绿色荧光）的优势

膜透性与活细胞标记能力
- Oxazole Yellow 是一种具有膜透性的荧光染料，可自由穿过活细胞的完整细胞膜，进入细胞内与 DNA 结合，适合活细胞或早期凋亡细胞的标记。
- 与 DNA 结合后发射绿色荧光（最大发射波长约 530nm），对正常细胞和早期凋亡细胞的细胞核具有高亲和力，染色后无需固定或破膜处理，操作简便且不影响细胞活性。
DNA 结合特异性与信号稳定性
- 优先结合 DNA 的 AT 碱基对区域，对 DNA 的标记特异性高于 RNA，减少非特异性染色背景。
- 荧光信号稳定，耐光漂白，适合长时间荧光观察或多轮染色实验，尤其适用于动态追踪细胞凋亡早期的核形态变化（如染色质凝集）。
光谱适配性与多色兼容
- 激发波长约 488nm，可被蓝光激光器或荧光显微镜的蓝光通道激发，与常见的 FITC 检测通道兼容，无需特殊设备。
- 绿色荧光与 PI 的红色荧光光谱差异显著，在流式细胞术或荧光显微镜下可通过不同通道独立检测，避免信号重叠，适合双参数凋亡分析。

二、PI（碘化丙啶，红色荧光）的优势

膜非透性与坏死 / 晚期凋亡细胞标记
- PI 是典型的膜非透性染料，只能进入细胞膜破损的细胞（如坏死细胞或凋亡晚期细胞），与 DNA/RNA 结合后发射红色荧光（最大发射波长约 617nm），可特异性标记死亡或膜受损的细胞。
- 通过染色强度差异区分坏死细胞（高 PI 荧光）与早期凋亡 / 正常细胞（低 PI 荧光），与 Oxazole Yellow 联合使用时，能精准划分细胞状态（正常细胞、早期凋亡、晚期凋亡 / 坏死）。
高荧光强度与核酸结合效率
- PI 与核酸结合后荧光强度显著增强（约 20-30 倍），即使少量 DNA 暴露也能产生强信号，适合检测低丰度的死亡细胞或微量样本。
- 对双链 DNA 的亲和力高于单链 DNA，在凋亡晚期细胞中（DNA 碎片化）仍能高效结合，确保标记准确性。
稳定性与抗干扰能力
- 化学性质稳定，不易被核酸酶降解，染色后样本可短期保存（4℃避光），适合批量处理或延时检测。
- 红色荧光在生物样本中的自发荧光干扰较低（相比绿色荧光），尤其适用于组织提取物或富含色素的细胞样本。

三、试剂盒整体应用优势

双参数检测区分凋亡阶段
Oxazole Yellow 标记活细胞 / 早期凋亡细胞（绿色荧光），PI 标记晚期凋亡 / 坏死细胞（红色荧光），通过荧光强度和细胞形态联合分析，可在单细胞水平上区分：
- 正常细胞：强绿色荧光，核形态规则；
- 早期凋亡细胞：绿色荧光减弱，核浓缩或碎片化；
- 晚期凋亡 / 坏死细胞：红色荧光强，核结构破坏。
  该模式避免了单一染料无法区分凋亡阶段的缺陷，减少误判风险。
活细胞动态检测适用性
- Oxazole Yellow 的膜透性允许在不破坏细胞的前提下进行实时染色，适合研究凋亡诱导过程中的动态变化（如药物处理后不同时间点的细胞状态），而 PI 仅在膜破损时染色，不影响早期凋亡进程。
多技术平台兼容性
- 适用于流式细胞术（双参数分析）、荧光显微镜（核形态观察）、高内涵筛选等场景：
- 流式细胞术：通过绿色 / 红色荧光强度区分细胞亚群，高通量分析凋亡比例；
- 荧光显微镜：结合核形态学（如染色质凝集、核碎裂），直观验证凋亡特征。

该试剂盒通过 Oxazole Yellow 与 PI 的互补作用，将 DNA 结合特性与膜通透性变化结合，为凋亡检测提供了兼具形态学和功能学的双重证据，尤其适合需要结合核形态分析的基础研究或药物开发场景。?

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