APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒（远红外，红色）提供了一种通过标记早期凋亡细胞（远红外）和坏死或晚期凋亡的细胞（红色）快速简便地检测细胞凋亡水平的方法。

Annexin V（膜联蛋白-V）是一种分子量为 35~36 KD 的 Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，可与磷脂酰丝氨酸 (PS) 选择性结合。磷脂酰丝氨酸 (PS) 主要分布在细胞膜内侧，即与细胞质相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面，暴露在细胞外环境中，此时，使用Annexin V-APC，与外翻的磷脂酰丝氨酸 (PS) 结合，就可用流式细胞仪或荧光显微镜直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。

碘化丙啶 (Propidium Iodide，PI) 是一种 DNA 结合染料，它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性细胞的细胞核，可以由波长为 488、532 或 546 nm 的激光激发，呈现红色荧光。

一、ApopView 488 Caspase-3 活细胞分析试剂盒（绿色荧光染料）

荧光染料优势

1. 活细胞兼容性高

   • 488 荧光染料（如 Alexa Fluor 488）具有良好的细胞膜通透性，可穿透活细胞，实现对 Caspase-3 活性的实时动态监测，避免固定或透膜处理对细胞状态的干扰。

   • 激发 / 发射波长（~495 nm 激发，~519 nm 发射）适配常见流式细胞仪和荧光显微镜（如 FITC 通道），兼容性强。

2. 高特异性与灵敏度

   • 染料通过与活化的 Caspase-3 特异性结合（如基于 DEVD 底物序列），仅在凋亡早期细胞中被切割并释放荧光，减少非凋亡细胞的背景信号。

   • 荧光强度与 Caspase-3 活性呈正相关，可定量检测早期凋亡事件，比 Annexin V 等方法更早捕捉凋亡信号。

3. 低细胞毒性

   • 染料化学性质稳定，对活细胞代谢影响小，可长时间（数小时）追踪凋亡进程，适合动态观察实验（如药物处理时间曲线）。

二、JC-1 线粒体膜电位检测试剂盒（绿色 / 红色荧光）

荧光染料优势

1. 膜电位依赖的双色荧光信号

   • JC-1（5,5',6,6'- 四氯 - 1,1',3,3'- 四乙基苯并咪唑羰花青碘化物）在正常线粒体中因高膜电位（ΔΨm）聚集形成多聚体，发射红色荧光（~590 nm）；

   • 当膜电位降低（如凋亡或细胞损伤时），JC-1 以单体形式存在于胞质中，发射绿色荧光（~525 nm）。

   • 优势：通过红绿荧光强度比值（Red/Green）定量膜电位变化，避免单一荧光因细胞密度、染料浓度等因素导致的误差。

2. 双参数分析提升准确性

   • 红色荧光代表线粒体功能完整性，绿色荧光反映膜电位崩解，可区分早期凋亡（膜电位尚未完全丧失）与坏死细胞（膜电位完全消失），减少结果误判。

3. 适用范围广

   • 可用于贴壁细胞、悬浮细胞及组织样本，兼容流式细胞术、荧光显微镜及微孔板检测，适合高通量筛选或机制研究。

三、FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒（绿色 / 红色荧光）

荧光染料优势

1. Annexin V（FITC 标记）的凋亡早期特异性

   • FITC（异硫氰酸荧光素，激发 / 发射～495/519 nm）标记的 Annexin V 可特异性结合凋亡细胞外翻的磷脂酰丝氨酸（PS），在凋亡早期（细胞膜尚未破裂时）即可检测，早于 DNA 片段化等晚期事件。

   • 绿色荧光信号强且稳定，适合流式细胞术分群（如与 PI 联合区分早期 / 晚期凋亡）。

2. PI（碘化丙啶）的坏死 / 晚期凋亡标记

   • PI（激发 / 发射～535/615 nm）为核酸染料，仅能穿透细胞膜破损的细胞（如坏死细胞或晚期凋亡细胞），与 DNA 结合后发射红色荧光，用于排除活细胞并标记死亡细胞。

   • 联合优势：FITC-Annexin V+PI 双染可将细胞分为四群：活细胞（-/-）、早期凋亡（+/-）、晚期凋亡 / 坏死（+/ +），实现凋亡进程的精确分期。

3. 操作简便与兼容性

   • 无需固定或透膜处理，适用于新鲜样本快速检测，且 FITC 和 PI 的荧光通道（FITC/PE-Texas Red）与多数流式细胞仪兼容。

四、BFTM 488-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒（AF 荧光 / 绿色 / 红色）

荧光染料优势

1. BFTM 488 标记的 Annexin V 特性

   • 抗光漂白能力更强，适合长时间成像或弱光信号检测；

   • 量子产率更高，荧光信号更亮，可检测低丰度 PS 外翻的早期凋亡细胞。

   • BFTM 488（BODIPY FL TM 488）是一种荧光亮度更高、光稳定性更强的绿色荧光染料（激发 / 发射～490/515 nm），相比传统 FITC：

2. 多色荧光组合的灵活性

   • 结合 BFTM 488（绿色）和 PI（红色），除常规凋亡分期外，还可与其他荧光标记（如 APC、PE 等）联合使用，实现多参数分析（如同时检测凋亡与细胞周期、表面标志物）。

3. 低背景与高信噪比

   • BFTM 488 的光谱特性与细胞自发荧光重叠少，且 PI 的红色荧光与绿色通道交叉干扰低，减少背景噪音，提升结果可靠性。

五、APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒（远红外 / 红色荧光）

荧光染料优势

1. APC 标记的 Annexin V 在多色分析中的优势

   • 长波长发射，减少与其他荧光染料（如 FITC、PE、PI）的光谱重叠，适合多色流式细胞术（如同时检测凋亡、细胞周期及活化标志物）；

   • 荧光强度高（天然荧光蛋白，量子产率高），可检测微量 PS 外翻，尤其适用于低表达 PS 的细胞类型。

   • APC（别藻蓝蛋白，激发 / 发射～650/660 nm）为远红外荧光染料，具有：

2. PI 的互补标记与远红外通道兼容性

   • APC 的远红外通道（如 APC-A）与 PI 的红色通道（如 PI-A）在流式细胞仪中可独立检测，避免信号串扰，适合复杂样本的精确分群（如肿瘤细胞异质性分析）。

3. 适用于特殊样本或仪器

4. ?远红外荧光受组织自发荧光影响小，适合活体组织切片、肿瘤样本等复杂背景下的凋亡检测，或搭配配备远红外激光的高端流式细胞仪使用。

如需进一步优化实验方案，可根据仪器配置（如荧光通道）、样本类型（活细胞 / 固定细胞）及检测目的（定性 / 定量）选择最合适的荧光染料组合。

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