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JC-1 线粒体膜电位检测试剂盒(绿色,红色)荧光染料在科研领域中的优势

2025-09-16

线粒体膜电位降低是细胞早期凋亡的一个标志,它发生在细胞膜上的磷酯酰丝氨酸外翻与 Caspase水解酶激活之前。当线粒体膜通透性发生改变时,膜电位会降低,这种膜电位的改变是由于 Bax 二聚体的形成和 Bid, Bak, Bad 的激活诱导线粒体膜形成孔隙造成的,当这些促凋亡蛋白被激活时,线粒体同时也将细胞色素 C 释放到细胞质中。

JC-1 线粒体膜电位检测试剂盒(绿色,红色) 是一种广泛用于检测线粒体膜电位 △Ψm 的理想荧光探针,它可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-1 线粒体膜电位检测试剂盒(绿色,红色) 聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-1 不能聚集在线粒体的基质中,为单体,可以产生绿色荧光。通过JC-1 线粒体膜电位检测试剂盒(绿色,红色) 从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到膜电位的下降,同时也可以用 JC-1 线粒体膜电位检测试剂盒(绿色,红色) 从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。

本试剂盒操作简单快速,可以通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪进行检测,同时提供了 CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。

1. 膜电位依赖的双色荧光信号

  • 电位敏感的聚集 - 单体转换:

    • 高膜电位(正常细胞):JC-1 在线粒体内因高膜电位驱动而聚集,发射红色荧光(激发 / 发射约 585/590 nm),呈现红色荧光颗粒。

    • 低膜电位(凋亡 / 损伤细胞):膜电位去极化时,JC-1 以单体形式存在于胞质中,发射绿色荧光(激发 / 发射约 510/527 nm),呈现弥散绿色荧光。

  • 双色可视化对比:通过红绿荧光强度比值(Red/Green)量化膜电位变化,避免单色染料(如罗丹明 123)因细胞摄取差异导致的误差,结果更具说服力。

2. 高特异性靶向线粒体

  • 线粒体膜电位驱动定位:JC-1 通过跨膜电位差(ΔΨm)特异性积聚于线粒体基质,而非依赖线粒体膜蛋白或转运体,适用于多种细胞类型(包括线粒体结构异常的细胞)。

  • 避免胞质荧光干扰:聚集态 JC-1 定位于线粒体,与胞质背景荧光分离,共聚焦成像时可清晰观察线粒体网络的膜电位异质性。

3. 动态监测与活细胞兼容

  • 实时反映膜电位变化:无需固定细胞,可直接对活细胞进行染色(孵育 15-30 分钟),通过流式细胞仪或荧光显微镜动态追踪膜电位丧失过程(如药物处理后数分钟至数小时)。

  • 低细胞毒性:JC-1 浓度通常为 5-20 μg/mL,短时间孵育对细胞代谢无显著影响,适合长期毒性实验或线粒体功能动态研究。

4. 量化分析与多色兼容

  • 流式细胞术精准量化:红绿荧光可分别通过流式细胞仪的 PE 通道(红色)和 FITC 通道(绿色)检测,计算 Red/Green 比值,量化膜电位变化幅度,适用于高通量样本筛选。

  • 多参数联合检测:可与 Annexin V-FITC(凋亡早期)、PI(坏死)或线粒体标志物(如 Tom20 抗体)联用,同步分析线粒体功能与细胞凋亡 / 坏死状态。

5. 操作简便与结果稳定

  • 一步法染色流程:只需将 JC-1 工作液加入培养基中孵育,无需洗涤或复杂预处理,相比 Western blot(检测细胞色素 c 释放)等方法节省 2-3 小时实验时间。

  • 结果重复性高:JC-1 的荧光信号强度与膜电位呈线性相关,不同批次实验的 CV 值 < 10%,适合机制研究或药物筛选中的重复验证。

6. 光谱特性优化检测灵敏度

  • 红光发射降低背景干扰:聚集态 JC-1 的红色荧光(590 nm)远离细胞自发荧光(多为 400-500 nm),减少背景噪音,尤其适用于富含色素的细胞(如巨噬细胞、肿瘤细胞)。

  • 双波长比值法校准误差:Red/Green 比值可校正细胞数、染料摄取量等变量,相比单色检测(如罗丹明 123 的绿色荧光)更能准确反映膜电位真实变化。

JC-1 通过 “膜电位依赖的双色荧光转换” 机制,在线粒体功能研究中实现了 “定性观察 + 定量分析” 的双重优势,尤其适用于需要动态追踪膜电位变化、多参数细胞状态分析的实验场景,是目前线粒体膜电位检测的金标准工具之一。

本文引用地址:https://www.med-life.cn/product/1296607.html

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