ApopView 488 Caspase-3 活细胞分析试剂盒（绿色），荧光染料在科研领域中的优势

2025-09-15

ApopView? 488 Caspase-3 Substrate 基于 caspase-3/7 活力检测细胞凋亡提，适用于荧光显微术和流式细胞术。相比其他基于 (FLICA) 分析的 Caspase 的荧光底物或荧光抑制剂，ApopView? 488 Caspase-3 Substrate 检测 caspase-3/7 活性的同时不会抑制完整细胞的凋亡过程。

Substrate 由耦合 Ccaspase-3/7 DEVD 识别序列的荧光 DNA 染料组成。Substrate 最初无荧光，穿过细胞膜进入细胞质，在凋亡细胞中，Caspase-3/7 剪切 Substrate，释放高亲和性的 DNA 染色，这种染料迁移到细胞核标记 DNA 并发出明亮的绿色荧光。因此，ApopView? 488 Caspase-3 Substrate 是双功能的，既可以检测 Caspase-3/7 活性，又可视化细胞核在细胞凋亡进行中的形态学变化。ApopView? 488 染色可以甲醛固定并兼容后续免疫染色实验。

ApopView? 488 Caspase-3 Substrate 提供 DMSO 和 PBS 两种溶解形式。PBS 形式可用于对DMSO 毒性敏感的细胞，在对 DMSO 不敏感的细胞类型中，添加 DMSO 溶解形式可增强ApopView? 488 的孵育染色效果。

1. 高特异性识别凋亡细胞

Caspase-3 特异性激活：荧光染料为 “底物 - 荧光探针” 偶联物（如 DEVD-AMC 与荧光基团 488 结合），仅在细胞凋亡时被激活的 Caspase-3 酶切割，释放出绿色荧光（激发 / 发射波长约 490/520 nm），避免非凋亡细胞的背景干扰。
区别于坏死细胞：坏死细胞因膜通透性增加会非特异性摄取染料，而该探针需酶切激活，仅在凋亡早期（膜完整时）即可特异性标记，适用于区分凋亡与坏死细胞。

2. 活细胞实时动态监测

细胞膜透性设计：染料以 AM（乙酰甲氧基）酯化形式存在，可自由穿过活细胞膜，进入细胞后被内源性酯酶水解为活性形式，避免对细胞的毒性和操作损伤。
实时追踪凋亡进程：无需固定或破膜，可直接对活细胞进行动态荧光成像（如共聚焦显微镜）或流式检测，捕捉 Caspase-3 激活的早期事件（如药物处理后数小时内的凋亡启动）。

3. 荧光信号稳定且灵敏

高强度绿色荧光：488 荧光基团光稳定性强，与传统 FITC 相比，抗光漂白能力更优，适合长时间活细胞成像，信号衰减慢。
低检测阈值：单个细胞内 Caspase-3 激活即可触发荧光探针切割，荧光强度与酶活性呈正相关，可检测微量凋亡细胞（如早期凋亡率 < 5% 的样本）。

4. 多色实验兼容性佳

光谱匹配常用设备：488 nm 激发光与流式细胞仪、荧光显微镜的 FITC 通道完全兼容，无需额外调整设备参数。
多参数联合分析：可与 PI、Annexin V-APC 等染料联用，同步检测细胞凋亡（Caspase-3 激活）、坏死（PI 阳性）或细胞膜损伤（Annexin V 结合），实现凋亡进程的多维分析。

5. 操作简便且实验周期短

一步法染色：仅需将染料加入培养基中孵育（通常 30 分钟 - 1 小时），无需洗涤或复杂预处理，相比 Western blot 等方法节省 3-4 小时实验时间。
适用范围广：可用于贴壁细胞（如 HeLa、293T）、悬浮细胞（如 Jurkat）及原代细胞（如免疫细胞），兼容多种培养体系（如 96 孔板高通量筛选、3D 细胞模型）。

6. 细胞毒性极低

非代谢抑制性设计：AM 酯化形式无活性，进入细胞后才释放荧光探针，对细胞增殖、周期等生理状态无显著影响，适合长期毒性实验或药物筛选。

该试剂盒的荧光染料通过 “酶切激活 + 活细胞透性 + 稳定荧光” 的设计，在凋亡检测中实现了 “特异性高、动态监测、多色兼容” 的优势，尤其适用于需要实时观察凋亡早期事件、多参数分析或高通量筛选的实验场景。

本文引用地址：https://www.med-life.cn/product/1296646.html

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