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NucGreen(2 mM in DMSO,绿色) 是一种膜渗透性的 DNA 染料,优先与 dsDNA 结合并发出绿色荧光,很适合用来染色活细菌,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都可进行染色。与 SYBR 系列染料不同,NucGreen(2 mM in DMSO,绿色) 是非常稳定的,它可以在室温下进行常规的处理和储存,而不会被降解。用 NucGreen(2 mM in DMSO,绿色) 染色的细菌可以通过荧光显微镜和流式细胞仪进行检测。
1. 广谱染色能力,覆盖多种样本类型
活细胞 / 细菌通用标记:NucGreen 是一种高亲和力的绿色核酸染料,可穿透活细胞(包括哺乳动物细胞、原代细胞、干细胞)及部分细菌(如革兰氏阳性 / 阴性菌)的细胞膜,与 DNA 双螺旋小沟结合,实现对活细胞 / 活菌的细胞核或拟核的特异性染色。
死细胞兼容:即使在细胞死亡后,细胞膜通透性增加,NucGreen 仍可进入细胞内标记 DNA,适用于总细胞计数(活细胞 + 死细胞),或与死细胞染料(如 EthD-III)联用进行活死细胞区分。
2. 高荧光强度与光稳定性,保障检测灵敏度
信号增强特性:NucGreen 与 DNA 结合后,荧光强度提升超过 100 倍,未结合时背景荧光极低,信噪比(S/N)可达 20:1 以上,即使在低细胞密度或微量样本中也能清晰成像。
抗淬灭性能:经 DMSO 溶解的 2 mM 储存液稳定性强,工作浓度下(通常 1-10 μM)在 488 nm 激光激发下光淬灭速率比传统 Hoechst 33342 降低约 30%,适合长时间动态观察(如活细胞实时成像)。
3. 低细胞毒性与温和染色条件
代谢干扰小:NucGreen 分子量约为 600 Da,结构设计优化后对细胞周期、增殖及基因表达无显著影响(如 HeLa 细胞经 10 μM 染色后,72 小时内细胞活力>95%),适用于活细胞功能研究(如干细胞分化、神经元活动追踪)。
操作便捷:染色步骤简单,无需固定或透膜处理,直接加入培养基中孵育 10-30 分钟即可,兼容流式细胞术、荧光显微镜、高内涵筛选等多种检测平台。
4. 光谱兼容性佳,支持多重荧光染色
绿色荧光通道适配:NucGreen 的激发 / 发射波长约为 495/515 nm,与 FITC、Alexa Fluor 488 等绿色荧光染料光谱重叠度高,可共用 488 nm 激光通道,同时与红色 / 近红外荧光染料(如 Cy3、Alexa Fluor 647)实现光谱分离,便于多指标共染(如 “NucGreen + 凋亡探针 + 细胞器标记”)。
低串扰特性:与 DAPI(蓝色)、PI(红色)等核酸染料联用时,光谱交叉干扰率<5%,可通过多通道采集实现细胞核形态、死活状态及 DNA 损伤的同步分析。
5. 宽应用场景与实验兼容性
微生物研究:除哺乳动物细胞外,NucGreen 可高效标记细菌(如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)、真菌(如酵母)的核酸,用于抗菌药物筛选、生物膜形成观察等,且对革兰氏阴性菌的染色效率比 SYTO 9 高约 20%。
组织切片与活体成像:在冰冻 / 石蜡切片中穿透力强(可穿透 30 μm 厚组织),配合抗原修复步骤可与免疫荧光抗体共染;在斑马鱼、果蝇等模式生物中,可通过显微注射实现体内细胞核标记,用于胚胎发育研究。
6. 稳定性与安全性优势
储存与使用便利性:2 mM DMSO 溶液在 - 20℃可稳定保存 6 个月以上,工作液在 4℃避光条件下可保存 1 周,且 DMSO 浓度在实验体系中通常<0.1%,无需担心细胞毒性。
环保无危害:不含叠氮化物、放射性物质或致癌成分,废液处理简单,符合实验室安全规范,相比同位素标记或溴化乙锭(EB)等传统染料更安全。
NucGreen 凭借其广谱染色能力、高荧光效率、低细胞毒性及优异的光谱兼容性,成为活细胞核酸标记的优选工具,尤其适用于需要保持细胞活性的动态研究、多重荧光分析及微生物 / 组织样本检测,为细胞增殖、分化、毒性评估等实验提供了便捷且可靠的解决方案。
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