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细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法,EdU 法检测试剂盒是 BrdU 法的革命性突破。EdU(5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链,检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应形成共价键。点击法的 EdU标记增殖快速有效、易于使用,只需多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU;BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,从而方便 BrdU 抗体结合。本试剂盒包含 EdU 法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。
操作简便:与传统的 BrdU 检测方法相比,无需进行 DNA 变性步骤或使用 harsh treatment,只需将细胞用多聚甲醛固定和 Triton X-100 穿透后,即可通过简单的点击反应将 Alexa Fluor 488 标记到新合成的 DNA 上,操作更加简便快捷,能节省时间和减少实验误差。
灵敏度高:Alexa Fluor 488 荧光染料具有较高的荧光强度,能够高效地标记掺入 DNA 中的 EdU,即使是少量的 EdU 掺入也能被准确检测到,可实现对单个细胞增殖情况的检测,适用于低细胞密度或微量细胞样本的增殖检测。
信号稳定:Alexa Fluor 488 具有良好的光稳定性,在荧光显微镜等检测设备的光照下,不易发生荧光淬灭,能够提供稳定的荧光信号,有利于长时间的观察和拍照,保证实验结果的可靠性。
兼容性好:该荧光染料与多种检测设备兼容,如荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪及荧光酶标仪等,可满足不同实验需求。此外,它还与其他荧光染料和抗体兼容,可与 Hoechst 33342 等细胞核染料同时使用,进行细胞周期分析,也可与其他抗体进行共染色,实现对细胞多种指标的同时检测。
细胞形态和抗原结构保存好:由于点击反应条件温和,不会对细胞形态、抗原结构和 DNA 完整性造成明显破坏,能够更好地保持细胞的原有状态,有利于对细胞的形态学和功能进行综合分析。
安全性高:与传统的放射性标记方法相比,使用 Alexa Fluor 488 荧光染料的 EdU 检测方法无放射性污染,对实验人员和环境更加安全。
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