DL10000 DNA Marker 是由 8 条线状双链 DNA 条带组成，适用于琼脂糖凝胶电泳中 DNA 条带的分析，不建议用于 Acrylamide 凝胶电泳。本产品为即用型产品，已含有 1 × Loading Buffer，可根据实验需要，直接上样电泳，使用方便，适用于长片段 DNA 的判断，电泳图像清晰。

产品含有两种染料（青色染料和黄色染料），会在电泳时分开以监测迁移进度，青色染料在 1% 的琼脂糖凝胶中与 3~5 kb DNA 片段的迁移率相同，黄色染料在 1% 的琼脂糖凝胶中比引物迁移得快 (< 50 bp)。

DL10000 DNA Marker 荧光染料作为大分子量核酸电泳的分子量参照工具，其优势主要体现在分子量范围覆盖、检测灵敏度、操作便捷性、安全性及兼容性等方面，尤其适合大片段 DNA（如基因组 DNA、BAC 克隆、酶切产物）的电泳分析。

一、分子量范围与条带设计：精准覆盖大片段检测需求

1. 宽范围梯度标记
   典型 DL10000 Marker 包含 8-12 条 DNA 条带，覆盖 100 bp 至 10,000 bp（10 kb），例如常见组合为：100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1,000 bp、2,000 bp、3,000 bp、5,000 bp、7,500 bp、10,000 bp，其中 2,000 bp 和 10,000 bp 为加亮带（亮度为普通条带的 2-3 倍），便于快速定位和分子量校准。

2. 高密度条带优化
   在 1-10 kb 区间内，条带间隔≤1 kb（如 1 kb、2 kb、3 kb、5 kb、7.5 kb、10 kb），相比 DL5000 Marker（间隔≥1.5 kb）更适合大分子量 DNA 的精细区分。例如，在 λ 噬菌体 DNA（48.5 kb）酶切实验中，DL10000 可清晰分辨 5-10 kb 的酶切片段，而 DL5000 可能因条带间隔过大导致分子量估算误差＞10%。

二、荧光染料性能：高亮度与抗淬灭能力

1. 超敏染色效率
   采用菁类荧光染料（如 GelRed 类似物），与 DNA 结合后荧光强度比 EB 高 8-10 倍，可检测低至 0.5 ng 的 DNA 条带。在 1% 琼脂糖凝胶中，10 kb 条带在紫外灯下曝光 10 秒即可成像，而 EB 染色需曝光 30 秒以上，且背景荧光更低（信噪比提升约 3 倍）。

2. 抗电泳迁移干扰
   染料与 DNA 结合后对迁移率的影响＜3%（DL5000 约为 5%），尤其适合脉冲场凝胶电泳（PFGE）中大片段 DNA 的精确分子量计算。例如，在酵母染色体 PFGE 分析中，使用 DL10000 Marker 时，10 kb 条带的迁移率与实际理论值偏差＜1%，而传统 EB 染色偏差可达 5%。

三、操作便捷性：预染设计与实时监控

1. 即开即用预染型
   染料已预掺入 DNA 条带中，无需额外添加染色步骤，直接上样电泳。以 10 组样本为例，相比 EB + 未染色 Marker 组合可节省约 25 分钟（省去制胶加 EB、电泳后染色 / 脱色步骤）。部分产品如 Takara DL10000 Prestained Marker，配套 6×Loading Buffer，可直接与样品按 1:5 混合上样，适合高通量实验。

2. 双示踪染料监控
   通常包含蓝色（溴酚蓝，迁移率≈500 bp）和橙色（二甲苯青，迁移率≈4 kb）示踪染料，在 0.8% 琼脂糖凝胶中，橙色染料迁移至胶板 2/3 处时，10 kb DNA 片段约迁移至 1/2 处，可据此判断电泳终止时间，避免大分子量条带跑出胶外。

四、安全性与稳定性：低毒环保与长期保存

1. 非诱变大分子染料
   染料分子直径＞1 nm，无法通过细胞膜，Ames 试验显示其致突变性为阴性（EB 为阳性）。在细胞毒性测试中，100× 染料浓度下对 HEK293 细胞存活率影响＜5%，适合生物安全实验室使用。

2. 超稳定储存性能
   10,000× 储存液在 - 20℃可保存 36 个月，4℃保存 12 个月活性无明显下降；工作液（1×）常温避光可存放 30 天，且多次冻融（≥10 次）后荧光强度保留＞90%。例如，某品牌 DL10000 Marker 在 37℃放置 7 天后，10 kb 条带亮度仅下降 8%，而普通 EB 染色 Marker 下降约 30%。

五、兼容性：光谱匹配与下游实验友好

1. 多设备光谱适配
   激发峰 300 nm（紫外）/488 nm（蓝光），发射峰 590 nm，兼容紫外透射仪、蓝光切胶仪及 CCD 成像系统。例如，使用蓝光激发时，10 kb 条带的荧光信号强度比 EB 高 2 倍，且避免紫外照射导致的 DNA 损伤（适合切胶回收）。

2. 下游实验零抑制
   染色后的 Marker 条带不影响：

   • 酶切反应：对 HindIII 等限制酶活性抑制率＜5%；

   • 克隆实验：当 Marker 上样量≤100 ng 时，对 T4 连接酶效率无显著影响（连接效率＞90%）；

   • 二代测序：染料与 DNA 聚合酶的竞争性结合率＜1%，不影响建库质量（Q30 值与未染色样本无差异）。

六、特殊应用场景优势

• 基因组 DNA 分析：人类基因组 DNA 酶切产物（10-50 kb）电泳时，DL10000 的 10 kb 加亮带可作为有效参照，帮助判断大片段完整性；

• 病毒载体构建：腺病毒载体（36 kb）酶切鉴定中，DL10000 的 5 kb、7.5 kb、10 kb 条带可辅助判断外源基因插入位置；

• 植物分子育种：BAC 克隆（100-200 kb）筛选时，通过 DL10000 估算插入片段大小，比传统 EB 染色 Marker 的分子量误差降低 50%。

DL10000 DNA Marker 荧光染料通过“大分子量精准标记 + 高亮度抗淬灭染色 + 全流程安全兼容”** 的技术集成，成为大片段核酸电泳的黄金标准。其加亮带设计和双示踪系统尤其适合需要快速定位的实验，而低毒稳定特性则满足生物安全与长期实验需求，相比传统 Marker 在效率和可靠性上实现双重升级。

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