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DNA 上样缓冲液 (6×) ,荧光染料在科研领域中的优势

2025-08-21

产品货号:PR01046

产品品牌:Medlife

DNA 上样缓冲液 (6×) 用于在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上装载 DNA Marker 和样品,在电泳过程中显示溴酚蓝和专利蓝 VF 两种指示物,这两种指示物的迁移方向与核酸相同,是电泳过程的粗略指标。

一、安全性:低毒环保与生物相容性

  1. 非诱变性设计
    多数产品采用大分子荧光染料(如类似 GelRed 的菁类染料),无法穿透细胞膜,Ames 试验证实其诱变性显著低于 EB(溴化乙锭)。例如,部分染料的细胞毒性测试显示,在 100× 工作浓度下对 T 细胞活性抑制率<10%,适合长期实验操作。

  2. 废弃物处理便捷
    工作浓度的染料可直接排入下水道或作为普通垃圾处理,无需像 EB 一样使用活性炭吸附或专用废液回收,降低实验室环保成本。

二、操作效率:预混上样与实时监控

  1. 一步法简化流程
    无需提前在凝胶中添加染料或电泳后染色,直接将 DNA 样品与 6× 缓冲液按 5:1 混合上样,减少制胶、染色、脱色等步骤。以 10 组样本为例,相比传统 EB 染色可节省约 40 分钟实验时间。

  2. 示踪染料双重监控
    通常包含两种示踪染料(如溴酚蓝和二甲苯青),在 1% 琼脂糖凝胶中,溴酚蓝约对应 300 bp 迁移位置,二甲苯青对应 4 kb 位置,可实时观察核酸电泳进程,避免过电泳导致条带丢失。

三、检测性能:高灵敏度与抗干扰能力

  1. 微量核酸高效染色
    荧光亮度可达 EB 的 5-10 倍,可检测低至 1 ng 的 dsDNA(如 100 bp 小片段),且对 ssDNA、RNA 也有一定染色效果。例如,在 PCR 产物鉴定中,10 μL 体系的扩增产物无需浓缩即可直接染色观察。

  2. 抗核酸迁移干扰
    染料分子与核酸结合后对电泳迁移率的影响小于 SYBR Green I(迁移率变化<5%),尤其适合需要精确分子量判断的实验(如限制性酶切图谱分析)。

四、兼容性:光谱适配与下游实验友好

  1. 广谱激发光适配
    多数染料激发 / 发射光谱与 EB 一致(激发峰 290 nm,发射峰 590 nm),可直接使用紫外透射仪或配备 EB 滤光片的成像系统,无需更换设备。部分产品支持蓝光激发(如 488 nm),兼容安全型蓝光切胶仪。

  2. 下游实验无抑制
    染色后的核酸可直接用于:

    • 酶切反应:对 BamHI 等限制酶活性抑制率<8%;

    • 测序:Sanger 测序中染料与 DNA 聚合酶竞争结合率<3%,不影响碱基读取;

    • 克隆:连接效率与未染色 DNA 相比无显著差异(p>0.05)。

五、稳定性与经济性

  1. 长期保存与耐受高温
    10,000× 储存液在 4℃可保存 24 个月以上,6× 工作液常温避光可存放 6 个月;制胶时可直接加入 70-80℃的琼脂糖溶液中,染料不降解(如 95℃处理 30 分钟后荧光强度保留>90%)。

  2. 低成本高性价比
    以 1 mL 6× 缓冲液计算,可处理约 500 个样本(每次上样 5 μL),单样本成本约 0.1 元,显著低于 EB + 上样缓冲液分开购买的组合(成本降低约 60%)。

六、典型应用场景

  • 快速 PCR 验证:临床样本的病原体基因检测中,直接用缓冲液染色后 15 分钟内完成电泳观察,适合急诊检测;

  • 高通量基因分型:STR 分型实验中,示踪染料可同步监控多通道电泳进度,提高基因芯片前处理效率;

  • 教育实验:教学实验室使用时,避免学生接触有毒 EB,同时简化实验步骤,更适合零基础操作。

DNA 上样缓冲液(6×)荧光染料通过 **“染色 + 上样 + 示踪” 三合一功能 **,在保证安全的前提下,将核酸电泳的操作效率提升约 50%,尤其适合追求实验便捷性的分子生物学实验室。其光谱兼容性和下游实验友好性,使其成为替代传统 EB 染色体系的理想选择。

本文引用地址:https://www.med-life.cn/product/1296880.html

联系方式:4006087598

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