ROX 参比染料（25 μM，红色），荧光染料在科研领域中的优势

2025-08-15

?产品货号：PR01027

产品品牌：Medlife

ROX 参比染料（25 μM，红色）用于对实时定量 PCR 或 RT-PCR 中的荧光报告基因信号进行标准化。不同仪器所需 ROX 参比染料（25 μM，红色）浓度不同，我公司提供 ROX 参比染料（25 μM，红色）储存液，浓度为 25 μM，用户可以根据仪器的推荐浓度进行使用。

一、稳定校正荧光信号，降低系统误差

1.不受扩增反应影响，提供恒定基准
ROX 染料本身不参与 PCR 扩增过程，也不与核酸结合，其荧光信号强度在整个反应中保持稳定（仅受自身浓度和仪器激发效率影响）。这一特性使其可作为 “内参基准”，校正因反应体系体积误差、仪器孔间光吸收差异、温度均一性波动等非特异性因素导致的荧光信号偏差。

例如，qPCR 实验中若某一反应孔因液体蒸发导致体积减少，目标荧光染料（如 SYBR Green I）的信号会被高估，而 ROX 的稳定信号可通过 “目标信号 / ROX 信号” 的比值校正这种偏差，使结果更可靠。

2.适配多通道检测仪器，兼容主流实验设计
ROX 荧光的激发波长约 580 nm，发射波长约 605 nm，与常用的目标荧光染料（如 FAM、VIC、SYBR Green I 等）的光谱重叠度低，可在多通道 qPCR 仪器中与目标信号同步检测，不干扰目标基因的荧光读数，同时实现实时校正。

二、提升数据重复性，优化实验可靠性

1.减少孔间差异，提高均一性
即使在同一块 PCR 板上，不同反应孔的光学特性、试剂分布可能存在细微差异（如边缘效应导致的温度不均）。ROX 校正可显著降低这些孔间偏差，使同一模板在不同孔中的检测结果更一致（CV 值更低），尤其适用于需要精确定量的实验（如基因表达差异分析、病毒载量检测）。

2.兼容不同模板类型，增强实验鲁棒性
无论是 cDNA、基因组 DNA 还是质粒模板，ROX 校正均能有效消除模板本身对荧光信号的非特异性影响（如某些模板可能自带微弱荧光或光吸收特性）。此外，对于复杂样本（如含抑制剂的临床样本），ROX 可部分抵消抑制剂对荧光检测的干扰，提高实验的抗干扰能力。

三、操作简便，适配常规 qPCR 流程

1.直接添加，无需额外优化步骤
ROX 参比染料通常以 25 μM 的工作浓度提供，可直接按比例（如 1:100 或 1:200）加入 PCR 反应体系，无需复杂的预处理或浓度摸索。多数商业化 qPCR 试剂盒已预装 ROX 或提供配套试剂，与主流酶（如 Taq DNA 聚合酶）和缓冲液兼容，不影响扩增效率。

2.适用于自动化和高通量实验
在高通量筛?。ㄈ?nbsp;384 孔板实验）中，手动加样误差或仪器系统误差更明显，ROX 校正可通过软件自动计算（多数 qPCR 仪器默认支持 ROX 校正功能），快速输出校正后的结果，减少人工分析成本，提升实验效率。

四、低毒性与高稳定性，适合长期储存与使用

1.化学性质稳定，储存条件宽松
ROX 染料在 DMSO 溶液中（25 μM 浓度）稳定性高，-20℃ 冷冻储存可保存 12 个月以上，反复冻融对其荧光强度影响小，便于实验室长期储备和多次使用。

2.对 PCR 反应无抑制作用
在推荐浓度下，ROX 对 Taq 酶活性、引物结合及 DNA 扩增无显著抑制，不会影响目标基因的扩增曲线和 Ct 值，保证定量结果的准确性。

ROX 参比染料的核心优势在于通过提供稳定的基准信号，有效校正 qPCR 中的非特异性干扰，从而提升数据的重复性、准确性和可靠性。其操作简便、兼容性强的特点，使其成为基因表达分析、病原体定量、拷贝数变异检测等 qPCR 实验中的 “标准配置”，尤其在要求严格定量的科研和临床诊断中不可或缺。

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ROX 参比染料（25 μM，红色），荧光染料在科研领域中的优势