EMA，荧光染料在科研领域中的优势

2025-08-15

产品货号：PR01024

产品品牌：Medlife

EMA 是一种高亲和性的 DNA 结合染料，光解后与 DNA 共价结合。该染料已被用于“标记” DNA 上的药物结合位点、修饰质粒 DNA 以及确定造血细胞在细胞周期中的表型、功能和位置。由于 EMA 不具有细胞膜渗透性，因此在死细胞和活细胞共同存在的情况下，EMA 可选择性地共价结合膜受损的死细胞的 DNA，通过荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪进行细胞分析。EMA 已被广泛应用在食品和水安全和环境测试中。

一、特异性标记死细胞，精准区分死活微生物 / 细胞

1.选择性穿透受损膜结构
EMA 的分子结构中含有叠氮基团（-N?），无法穿透完整的细胞膜（活细胞的典型特征），但能快速进入细胞膜受损的死细胞（或凋亡 / 坏死细胞），并与细胞内的双链 DNA（dsDNA）特异性结合，形成稳定的荧光复合物。这一特性使其能精准区分活细胞与死细胞，尤其在微生物（细菌、真菌）活性检测中表现突出 —— 例如，在食品微生物安全检测中，可快速鉴别活菌与加热灭活的细菌，避免死菌核酸干扰导致的假阳性结果。

2.光固化增强稳定性，降低背景干扰
与 dsDNA 结合后，EMA 在强光（如可见光或紫外光）照射下会发生光化学反应，叠氮基团转化为高活性的氮烯（nitrene），与 DNA 共价结合形成不可逆复合物。这种 “光固化” 特性可锁定死细胞信号，后续即使经过核酸提取步骤，死细胞的 DNA 仍能保持标记，而活细胞因未被染色，其 DNA 提取后无荧光信号，显著降低检测背景，提高结果准确性。

二、高灵敏度与低毒性，适配多样本类型

1.荧光信号强，检测限低
EMA 与 dsDNA 结合后，在紫外激发下（最大激发波长约 370 nm，发射波长约 590 nm）产生强红色荧光，灵敏度接近 SYBR Green I，可检测低至纳克级（ng）的死细胞 DNA。这一特性使其适用于低丰度死细胞检测，如环境水样中微量死菌的监测、临床样本中凋亡细胞的定量分析。

2.对活细胞毒性低，不干扰生理活性
由于无法穿透活细胞完整细胞膜，EMA 对活细胞的代谢活动、增殖能力影响极小（远低于溴化乙锭 EB）。因此，在实验中可先标记死细胞，再对活细胞进行后续培养或功能分析（如细菌耐药性测试、细胞迁移实验），实现 “一次染色，双重分析”。

三、操作简便，兼容多种实验流程

1.无需复杂前处理，快速标记
EMA 染色步骤简单：仅需将染料与样本（如细菌悬液、细胞培养物）孵育（通常 10-15 分钟），经强光照射固化后即可进行后续检测（如荧光显微镜观察、流式细胞术分析、qPCR 定量）。相比传统的活菌计数方法（如平板计数法，需培养数天），极大缩短实验周期。

2.与核酸提取和 qPCR 兼容，实现分子水平验证
经 EMA 标记并光固化的死细胞 DNA，在提取后仍可通过荧光定量或 PCR 检测（死细胞 DNA 因被 EMA 修饰，可能抑制 PCR，需结合对照分析），实现 “形态观察 + 分子验证” 的双重确认。例如，在研究抗生素杀菌效果时，可通过 EMA 标记死菌，再结合 qPCR 定量死菌 DNA，评估药物效力。

四、成本低廉，应用场景广泛

1.性价比高于特异性探针
与昂贵的荧光标记抗体（如活细胞染料 Calcein-AM 与死细胞染料 PI 的组合）或核酸探针相比，EMA 价格低廉，且单次实验用量少（通常工作浓度为 1-5 μg/mL），适合大规模筛选实验（如药物高通量杀菌测试）。

2.跨领域适配性强

微生物学：饮用水、食品中活菌 / 死菌鉴别，细菌生物膜活性分析；

细胞生物学：凋亡细胞检测，化疗药物诱导的细胞死亡评估；

环境科学：水体、土壤中微生物活性监测，污染修复效率评估。

EMA 荧光染料的核心优势在于对死细胞的特异性标记、光固化稳定性、操作简便性及低成本，尤其在需要区分死活细胞的场景中，能有效弥补传统方法（如平板计数、普通荧光染色）的缺陷。其与多种检测技术（显微镜、流式细胞术、qPCR）的兼容性，使其成为连接细胞形态观察与分子水平分析的桥梁，在科研、临床诊断及工业质控中具有不可替代的应用价值。

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