一管化 RT Mix with DNase，荧光染料在科研领域中具有的优势及其价值

2025-08-08

产品货号：PR01011

产品品牌：Medlife[陌孚医药]

一管化 RT Mix with DNase 是一个将 RNA 合成 cDNA 的操作更为简便的系统，含有第一链 cDNA 合成所需的全部试剂，仅需加入 RNA 模板和水即可进行逆转录反应，操作非常方便。使用该逆转录预混液 15 min 内最长可获得 12 kb 大小的 cDNA。合成的 cDNA 推荐用于 qPCR 反应。

该预混液采用特制的高效 DNase，该酶具有热敏感性，可在高温条件下快速不可逆地失活，因此仅需一次加样，即可同管进行去除基因组 DNA 污染与逆转录反应，与使用 DNase I去除基因组 DNA污染相比，无需额外加入 EDTA 进行失活，不仅减少了对 RNA 模板的损伤、降低 RNase 污染风险而且节省实验时间。

一、核心功能集成，简化实验流程

1.“一管化” 减少操作步骤
传统实验中，RNA 样本需先经 DNase 处理去除 gDNA，再进行逆转录，过程中需多次移液、离心和换管，易导致样本损失或污染。而该试剂将 DNase 消化、逆转录酶、缓冲液、引物及荧光染料等成分预混，可直接加入 RNA 样本后 “一管完成”，减少移液次数（通常仅需 1-2 步），降低人为操作误差和样本损失风险，尤其适合高通量实验（如 96 孔板检测）。

2.同步实现 gDNA 去除与逆转录
试剂中的 DNase 可在逆转录反应前或反应初期特异性降解基因组 DNA，避免其干扰后续 qPCR 等实验（如假阳性信号），同时逆转录酶在最适条件下将 RNA 转化为 cDNA，两步反应在同一体系中完成，无需额外纯化或换管，显著缩短实验时间（通常可节省 30%-50% 操作时间）。

二、荧光染料赋能实时质控与精准监测

1.实时追踪反应进程
荧光染料（如针对 cDNA 合成的特异性染料）可随逆转录反应进行而动态发出荧光，通过荧光强度变化实时监测 cDNA 合成效率：

若荧光信号弱或无增长，可及时判断 RNA 降解、酶活性不足等问题，避免后续实验浪费；

对不同样本的荧光强度进行对比，可初步评估 cDNA 产量差异，为后续定量实验（如 qPCR）的模板量调整提供参考。

2.特异性区分 cDNA 与残留杂质
优质荧光染料对 cDNA 的结合特异性高，对未反应的 RNA、引物或 gDNA 降解产物交叉反应低，可减少杂质对检测结果的干扰，尤其适合复杂样本（如富含抑制剂的临床样本）的检测。

3.兼容荧光检测设备，快速读数
可直接通过荧光分光光度计、qPCR 仪或便携式荧光检测仪读取信号，无需额外显色或电泳步骤，实现 “反应 - 检测” 无缝衔接，提升实验效率。

三、提升结果可靠性与稳定性

1.降低污染风险
一管化操作减少了样本与外界环境的接触机会，同时预混试剂避免了多次开盖加样导致的气溶胶污染，尤其对痕量核酸检测（如病毒 RNA 逆转录）至关重要。

2.试剂稳定性更高
预混体系经过优化，各成分（如逆转录酶、DNase、荧光染料）在储存和反应过程中相互兼容，减少因单独配制导致的活性损失，批间差异更小，实验重复性更优。

3.避免 DNase 残留干扰
试剂中的 DNase 通常为热敏感型，在逆转录反应升温（如 42-50℃）时自动失活，无需额外步骤去除，避免残留 DNase 降解后续实验中的 cDNA 或 DNA 模板。

四、对科研的实际价值

· 适用于微量 / 珍贵样本：减少操作中的样本损失，适合单细胞 RNA、外泌体 RNA 等低丰度样本的逆转录。

· 加速高通量实验：在基因表达谱分析、药物筛选等大规模实验中，显著缩短流程，降低人力成本。

· 提高结果可信度：通过 gDNA 去除和实时质控，减少假阳性和数据偏差，为后续 qPCR、测序等实验提供可靠的 cDNA 模板。

总而言之，一管化 RT Mix with DNase 荧光染料通过整合关键步骤、引入实时监测，解决了传统逆转录实验中操作繁琐、污染风险高、质控滞后等问题，是分子生物学、医学诊断、遗传学等领域高效研究的重要工具，尤其在对实验效率和结果可靠性要求较高的场景中优势显著。

本文引用地址：https://www.med-life.cn/product/1296469.html

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